Cirkuliuojančios DNR (ctDNA) tyrimas
Cirkuliuojančios DNR (ctDNA) tyrimas - tai modernus genetinės diagnostikos metodas, leidžiantis aptikti naviko kilmės DNR fragmentus kraujyje. Šis minimaliai invazyvus tyrimas, dar vadinamas skystąja biopsija, yra vis dažniau taikomas onkologijoje, prenatalinėje diagnostikoje ir transplantacijos stebėjime. Jis suteikia vertingos informacijos apie naviko mutacijas, gydymo efektyvumą ir ligos progresavimą be invazinių audinių biopsijų.
Funkcija
- Aptinka specifines DNR mutacijas, būdingas navikinėms ląstelėms.
- Leidžia stebėti naviko atsaką į gydymą ir anksti nustatyti atsparumą terapijai.
- Suteikia galimybę įvertinti minimalų liekamąjį naviką po gydymo.
- Taikoma prenatalinėje diagnostikoje vaisiaus chromosominių anomalijų nustatymui.
Kilmė
- ctDNA išsiskiria iš apoptozės ar nekrozės būdu žūvančių naviko ląstelių.
- Taip pat gali būti išskiriamas aktyviai gyvų naviko ląstelių (pvz., egzosomų pavidalu).
- Jo koncentracija kraujyje priklauso nuo naviko dydžio, vaskuliarizacijos ir ląstelių apykaitos greičio.
Procedūra
- Pacientui paimamas veninis kraujas (paprastai 2×10 ml EDTA mėgintuvėliuose).
- Kraujo plazma atskiriama centrifugavimo būdu per kelias valandas po paėmimo.
- Iš plazmos išskiriama ląsteleivė DNR, kuri vėliau amplifikuojama ir sekvenuojama.
- Naudojami didelio jautrumo metodai, tokie kaip skaitmeninė PGR arba naujos kartos sekvenavimas (NGS).
- Rezultatai pateikiami kaip teigiami (aptikta mutacija) arba neigiami (neaptikta), kartais nurodant alelio dažnį.
Pasiruošimas
- Specialaus pasiruošimo nereikia, tačiau rekomenduojama vengti intensyvaus fizinio krūvio prieš tyrimą.
- Kraują geriausia duoti ryte nevalgius arba praėjus 4 valandoms po valgio.
- Būtina informuoti gydytoją apie vartojamus vaistus, ypač antikoaguliantus.
Priežastys
- Teigiamas rezultatas rodo, kad kraujyje aptikta mutacijų, būdingų navikinėms ląstelėms.
- Gali patvirtinti vėžio diagnozę, kai kiti tyrimai yra neaiškūs (pvz., plaučių mazgeliai).
- Stebint gydymą, teigiamas ctDNA po terapijos rodo liekamąjį naviką arba atsparumą vaistams.
- Prenatalinėje patikroje teigiamas rezultatas gali rodyti vaisiaus chromosominį sutrikimą (pvz., 21 trisomiją).
- Retais atvejais gali būti klaidingai teigiamas dėl klonalinio hematopoezės (CHIP) arba laboratorinių artefaktų.
Tolimesni veiksmai
- Teigiamą ctDNA rezultatą būtina patvirtinti papildomais tyrimais (audiovizualiniais, histologiniais).
- Onkologijoje dažnai atliekama pakartotinė ctDNA analizė po kelių savaičių siekiant įvertinti dinamiką.
- Prenatalinės diagnostikos atveju rekomenduojama invazinė diagnostika (amniocentezė, chorionbiozija).
Specialistai
- Onkologai - vėžio diagnostikai, gydymo stebėjimui ir recidyvų prognozavimui (ypač plaučių, krūties, storosios žarnos vėžys).
- Genetikai - įgimtų mutacijų vertinimui ir vaisiaus sveikatos tikrinimui nėštumo metu.
- Gastroenterologai - kolorektalinio vėžio ankstyvai diagnostikai (kaip papildomas metodas).
- Hematologai - limfomų ir mielomų molekuliniam stebėjimui.
Situacijos
- Kai naviko biopsija yra techniškai sudėtinga arba pavojinga (pvz., plaučiuose).
- Gydymo efektyvumo vertinimui realiu laiku be invazinių procedūrų.
- Po radikalaus gydymo (operacijos, spindulinės terapijos) siekiant užtikrinti, kad neliko naviko ląstelių.
- Prenatalinėje patikroje vyresnėms nei 35 metų nėščiosioms dėl padidėjusios chromosominių anomalijų rizikos.
