Cirkuliuojanti mikroRNR
Cirkuliuojanti mikroRNR (miRNR) - tai mažos (apie 22 nukleotidų ilgio), nekoduojančios RNR molekulės, randamos kraujyje, šlapime ir kituose kūno skysčiuose. Jos reguliuoja genų ekspresiją po transkripcijos ir atlieka svarbų vaidmenį ląstelių komunikacijoje. Dėl savo stabilumo ir specifiškumo cirkuliuojanti miRNR yra intensyviai tiriama kaip potencialus neinvazinis biologinis žymuo įvairioms ligoms - nuo vėžio iki širdies ir kraujagyslių patologijų - diagnozuoti, prognozuoti ir stebėti gydymo atsaką.
Funkcija
- Sujungus su tikslinių genų mRNR, blokuoja jų vertimą į baltymus arba skatina skilimą
- Dalyvauja ląstelių proliferacijoje, diferenciacijoje, apoptozėje ir metabolizme
- Tarpininkauja tarp ląstelių komunikacijai - pernešama egzosomomis ir kitomis pūslelėmis
Savybės
- Išskirtinis stabilumas kraujyje - atspari fermentų skaidymui dėl apsauginių baltymų
- Audiui specifinė ekspresija - skirtingi miRNR profiliai būdingi skirtingiems audiniams
- Galimybė aptikti neinvaziškai - iš kraujo plazmos, serumo, šlapimo ar seilių
Kilmė
- Išskiriama iš navikinių ląstelių (onkogeninės arba naviką slopinančios miRNR)
- Išsiskiria iš pažeistų ar uždegiminių audinių (pvz., miokardo infarkto metu)
- Gaminama imuninių ląstelių, endotelio ir stromos ląstelių
Mėginio paėmimas
- Veninio kraujo paėmimas į specialų mėgintuvėlį su EDTA arba be priedų
- Plazmos arba serumo atskyrimas centrifuguojant (< 2 val. po paėmimo)
- Mėginių laikymas -80 °C temperatūroje iki tolimesnės analizės
Laboratorinė analizė
- Bendros RNR (įskaitant mažas RNR) ekstrakcija ir gryninimas
- Atvirkštinė transkripcija (RT) - miRNR pavertimas komplementaria DNR
- Kiekybinė realaus laiko polimerazės grandininė reakcija (qRT-PGR) naudojant specifinius pradmenis
- Duomenų normalizavimas pagal endogeninius kontrolinius genus (pvz., RNU6B, miR-16)
Galimos priežastys
- Navikiniai procesai - padidėjusi onkogeninių miRNR (pvz., miR-21, miR-155) ekspresija siejama su krūties, plaučių, kasos ir storosios žarnos vėžiu
- Širdies ir kraujagyslių ligos - miR-208 ir miR-499 ženkliai išauga po miokardo infarkto; miR-126 susijusi su endotelio funkcija
- Uždegiminės ir autoimuninės ligos - miR-146a ir miR-155 padidėja sergant reumatoidiniu artritu, sistemine raudonąja vilklige
- Kepenų pažeidimai - miR-122, būdinga kepenų ląstelėms, išsiskiria į kraują sergant hepatitu, ciroze ar kepenų vėžiu
- Infekcinės ligos - virusinės infekcijos (pvz., HCV, HBV) gali keisti šeimininko miRNR profilį
Pagrindinės klinikinės situacijos
- Įtariamas piktybinis navikas, ypač kai nėra tikslių neinvazinių žymenų
- Ankstyva vėžio recidyvo ar metastazių diagnostika
- Širdies išemijos ar ūmaus miokardo infarkto patvirtinimas ir prognozės vertinimas
- Lėtinių kepenų ligų (hepatito, cirozės) aktyvumo ir fibrozės laipsnio nustatymas
- Autoimuninių ligų aktyvumo stebėjimas
- Gydymo atsako (pvz., chemoterapijos, biologinės terapijos) vertinimas realiu laiku
Konsultuojantys gydytojai
- Onkologas
- Kardiologas
- Gastroenterologas
- Reumatologas
- Infektologas
