Congo red dažymas
Congo red dažymas yra specializuotas histocheminis metodas, naudojamas amiloidinės medžiagos aptikimui audinių mėginiuose. Šis tyrimas padeda diagnozuoti amiloidozę - ligą, kurios metu netirpūs baltymai kaupiasi organuose ir audiniuose. Rezultatas vertinamas kaip teigiamas ar neigiamas, remiantis specifiniu raudonai oranžiniu dažymusi ir žalios spalvos dvejopu lūžiu (birefringence) poliarizuotoje šviesoje.
Funkcija
- Congo red dažymas specifiškai jungiasi prie amiloido pluoštelių beta klostytosios struktūros, todėl leidžia vizualizuoti amiloido nuosėdas audiniuose.
- Poliarizacinės mikroskopijos metu dažyti amiloido plotai įgauna obuolių žalumos spalvos dvejopą lūžį (birefringence), kas yra patognominis amiloidozės požymis.
- Tyrimas dažniausiai atliekamas ant biopsinės medžiagos pjūvių, gali būti naudojamas ir citologiniams mėginiams.
Kilmė
- Dažiklis Congo red (dinatrio 3,3′-[(1,1′-bifenil)-4,4′-diilbis(azo)]bis(4-amino-1-naftalensulfonatas) yra sintetinis azodažiklis, sukurtas dar XIX amžiuje.
- Jis pradėtas naudoti medicinoje 1920-aisiais, o specifinis gebėjimas surišti amiloidą buvo atrastas 1959 m. (Puchtler, Sweat ir Levine).
- Nuo tada Congo red dažymas išlieka auksiniu standartu amiloidozei diagnozuoti audinių patologijoje.
Procedūra
- Pirmiausia audinio pjūvis (histologinis mėginys) fiksuojamas formalinu ir parafinuojamas.
- Parafinizuoti pjūviai 10-15 min. inkubuojami su Congo red tirpalu, po to trumpai diferencijuojami šarminiame etanolio tirpale.
- Mėginys tiriamas šviesos mikroskopu: amiloidas atrodo raudonai oranžinis prieš šviesų foną.
- Siekiant patvirtinti, pjūvis tiriamas poliarizaciniu mikroskopu - tipiškas amiloidas rodo ryškią obuolių žalumos dvejopą lūžį.
- Gali būti atliekami papildomi etapai, pvz., prieš dažymą paveikiant kalio permanganatu, siekiant atskirti AA ir AL amiloido tipus.
Priežastys ir klinikinė reikšmė
- Teigiamas Congo red dažymas su būdingu obuolių žalumo dvejopu lūžiu rodo amiloido nuosėdas audiniuose.
- Tai patvirtina sisteminės ar lokalinės amiloidozės diagnozę. Sisteminė amiloidozė gali būti pirminė (AL, susijusi su plazmos ląstelių diskrazija) ar antrinė (AA, sergant lėtinėmis uždegiminėmis ligomis, pvz., reumatoidiniu artritu, tuberkulioze).
- Lokalinė amiloidozė gali pasireikšti atskiruose organuose, pvz., šlapimo pūslėje ar odoje.
- Klaidingai teigiami rezultatai reti, tačiau stipri kolageno birefringence gali būti panaši; specializuota laboratorija gali naudoti papildomus metodus (imunohistocheminį dažymą) tipui nustatyti.
Dažniausios situacijos
- Įtariant sisteminę amiloidozę pacientui, sergančiam neaiškios kilmės inkstų nepakankamumu, kardiomegalija, periferine neuropatija ar hepatomegalija.
- Rekomenduojama atliekant riebalinio audinio aspiraciją ar inkstų biopsiją vertinant amiloidozės galimybę.
- Taip pat gali būti naudinga nustatant amiloidozės tipą (AL vs. AA) prieš gydymo pradžią.
- Dažniausiai užsakoma: patologo, nefrologo, hematologo, kardiologo ar reumatologo.
