CD55 CD59 ekspresija
CD55 CD59 ekspresijos tyrimas yra laboratorinis metodas, naudojamas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos (PNH) diagnostikai. Jis nustato ląstelėse esančius CD55 ir CD59 baltymus, apsaugančius nuo komplemento sistemos aktyvavimo bei ląstelių irimo.
Baltymų funkcija
- CD55 („skilimo greitėjimo faktorius“) slopina C3 ir C5 konvertazes, taip apsaugodamas ląsteles nuo komplemento kaskados.
- CD59 („membranos atakos komplekso inhibitorius“) neleidžia formuotis membranos atakos kompleksui, kuris pradurtų ląstelės membraną.
- Šie baltymai yra būtini normaliai raudonųjų ir baltųjų kraujo ląstelių apsaugai nuo autoimuninio sunaikinimo.
Klinikinė reikšmė
- PGR mutacijos PIG-A gene sukelia CD55 ir CD59 trūkumą, todėl ląstelės tampa jautrios komplemento veikimui.
- Tai yra pagrindinis paroksizminės naktinės hemoglobinurijos (PNH) patofiziologinis mechanizmas.
- Tyrimas leidžia nustatyti PNH klono dydį kraujyje, kas padeda prognozuoti ligos eigą ir parinkti gydymą.
Procedūra
- Iš paciento paimamas veninis kraujo mėginys, stabilizuotas EDTA arba heparinu.
- Mėginys inkubuojamas su fluorescenciniais monokloniniais antikūnais prieš CD55 ir CD59, taip pat su kontroliniais žymenimis (pavyzdžiui, CD235a eritrocitams).
- Po praplovimo ir fiksavimo ląstelės analizuojamos srauto citometrijos būdu - nustatoma fluorescencijos intensyvumo histograma.
- Vertinama CD55 ir CD59 raiška atskirose ląstelių populiacijose (eritrocitai, granulocitai, monocitai).
Normalus rezultatas
- Normalios ląstelės turi aiškią, teigiamą CD55 ir CD59 raišką ant paviršiaus.
- Eritrocituose abiejų žymenų fluorescencija yra homogeniška ir atitinka kontrolinių mėginių lygmenį.
Nukrypimas nuo normos
- Sumažėjusi arba visiškai neigiama CD55 ir (arba) CD59 raiška rodo ląstelių defektą.
- Toks fenotipas būdingas PNH klonui, kurio ląstelės netenka apsaugos nuo komplemento.
- Klonas apibūdinamas procentine dalimi nuo bendro ląstelių skaičiaus - didesnis klonas siejamas su sunkesnėmis trombozių ir hemolizės komplikacijomis.
Klinikinis kontekstas
- Tyrimo rezultatas padeda atskirti PNH nuo hemolizinių anemijų, susijusių su membranos defektais (pvz., sferocitozės).
- Jis taip pat naudingas vertinant gydymo poveikį (pvz., ekulizumabo) ir stebint ligos progresavimą.
Indikacijos
- Įtariant PNH, kuomet pasireiškia naktinė hemoglobinurija, neaiškios kilmės trombozės (ypač veninės), pilvo skausmai ar nuovargis.
- Vertinant lėtinės hemolizės priežastis, jei tiesioginis antiglobulino testas (Coombs) yra neigiamas.
- Stebint PNH klono dinamiką po gydymo ar kaulų čiulpų transplantacijos.
Konsultuojami specialistai
- Hematologas - pagrindinis specialistas, atsakingas už PNH diagnostiką ir gydymą.
- Nefrologas - esant ūminiam inkstų pažeidimui dėl intravaskulinės hemolizės.
- Kraujagyslių chirurgas ar flebologas - vertinant trombozines komplikacijas.
