Gamma H2AX foci tyrimas
Gamma H2AX foci tyrimas yra jautrus DNR dvigubų grandžių trūkių žymuo. Jis naudojamas vertinti ląstelių atsaką į jonizuojančiąją spinduliuotę, chemoterapiją ar kitus genotoksinius veiksnius. Tyrimas padeda nustatyti DNR pažeidimo mastą ir atsako į gydymą efektyvumą.
Funkcija
- Žymi DNR dvigubų grandžių trūkių vietas fosforilintos histono H2AX formos (γ-H2AX) atsiradimu
- Leidžia kiekybiškai įvertinti DNR pažeidimo lygį atskirose ląstelėse
Pagrindiniai faktai
- γ-H2AX židiniai susidaro per kelias minutes po DNR pažeidimo
- Židinių skaičius koreliuoja su DNR trūkių skaičiumi
- Tyrimas atliekamas imunofluorescenciniu dažymu arba srauto citometrija
Procedūra
- Paimamas kraujo mėginys (kartais audinio bioptatas arba odos fibroblastai)
- Ląstelės fiksuojamos, permeabilizuojamos ir dažomos anti-γ-H2AX antikūnais
- Židiniai vizualizuojami fluorescenciniu mikroskopu arba kiekybiškai vertinami srauto citometru
- Rezultatas pateikiamas kaip vidutinis židinių skaičius ląstelėje
Padidėjęs židinių skaičius
- Neseniai buvęs radiacinis poveikis (spindulinė terapija, branduolinės avarijos)
- Chemoterapija (ypač topoizomerazės inhibitoriai, platina, antraciklinai)
- DNR atstatymo sistemų defektai (pvz., BRCA mutacijos, ATM trūkumas)
- Stiprus oksidacinis stresas ar toksinai
Klinikiniai atvejai
- Vertinant radioterapijos ar chemoterapijos sukeltą DNR pažeidimą
- Nustatant pacientų jautrumą spinduliuotei prieš gydymą
Gydytojų specialybės
- Onkologas radioterapeutas
- Genetikas arba klinikinis genetikas
