53BP1 foci tyrimas
53BP1 foci tyrimas - tai specializuotas ląstelės branduolio tyrimo metodas, leidžiantis įvertinti DNR dvigrandžių trūkių atsako efektyvumą. Jis naudojamas onkologijoje, radiobiologijoje ir genetinėje diagnostikoje, siekiant nustatyti, kaip ląstelė reaguoja į pažeidimus - ar kaupia DNR pažeidimo žymenis, ar geba juos taisyti.
Funkcija
- 53BP1 (p53 binding protein 1) yra baltymas, kuris kaupiasi DNR dvigrandžių trūkių vietose, sudarydamas matomus židinius (foci) ląstelės branduolyje.
- Tyrimas padeda įvertinti DNR reparacijos kelio aktyvumą - kiek efektyviai ląstelė signalizuoja apie pažeidimus ir inicijuoja jų taisymą.
- Tai kokybinis tyrimas: vertinamas foci skaičius, dydis ir pasiskirstymas ląstelėje po apšvitos ar kito genotoksinio poveikio.
Kilmė
- Biopsinė medžiaga (navikinė arba sveiko audinio biopsija).
- Kraujo limfocitai (stimuliuoti arba po radiacinio poveikio).
- Ląstelių kultūros (in vitro eksperimentuose).
Procedūra
- Paimama mėginio dalis (biopsija, kraujas ar ląstelės) ir, jei reikia, apšvitinama kontroliuojama radiacijos doze.
- Ląstelės fiksuojamos ir permuojamos, o 53BP1 baltymas žymimas fluorescenciniais antikūnais (imunocitochemija).
- Naudojant konfokalinį mikroskopą, suskaičiuojamas foci skaičius vienoje ląstelėje - paprastai vertinama 100-200 branduolių.
- Rezultatas pateikiamas kaip vidutinis foci skaičius viename branduolyje (foci/nucleus) arba kaip teigiamų ląstelių procentas.
Galimos priežastys
- Naujausias jonizuojančios spinduliuotės ar radioimituojančių cheminių medžiagų poveikis (pvz., radioterapija, branduolinės avarijos).
- Genetiniai defektai reparacijos keliuose (pvz., BRCA1/2 mutacijos, Ataxia telangiectasia), kai ląstelė negali ištaisyti trūkių, o jie kaupiasi.
- Piktybinių navikų ląstelėse, ypač po chemoterapijos, dažnai stebimas padidėjęs foci skaičius - tai rodo sustojusią ar neefektyvią reparaciją.
Klinikinės situacijos
- Radiacinių avarijų ar profesinio poveikio atvejais - norint įvertinti individualią ląstelių radiojautrą.
- Onkologijoje prieš pradedant radioterapiją - siekiant nustatyti naviko jautrumą spinduliuotei arba normalių audinių atsaką.
- Genetinių DNR reparacijos sindromų (pvz., Nijmegen breakage sindromo) diagnostikoje.
Gydytojų specialybės
- Radiologai onkologai (kurie planuoja radioterapiją).
- Genetikai ir molekuliniai biologai (genetinių konsultacijų metu).
- Profesinės sveikatos specialistai (stebintys radiacijos poveikį).
